微生物基本知识
一、选择题部分
1、某样品检测菌落总数时，样品稀释100倍后取1mL接种，两个平行平板的菌落数分别为126和119，空白对照无菌生长，那么该样品的菌落总数为（ ）CFU/mL。
A、12250 B、1.225×104 C、1.23×104 D、1.2×104
2、细菌形态、染色、生物活性很典型的时期是（ ）
A、迟缓期 B、对数生长期 C、稳定期 D、衰亡期
3、大肠杆菌分裂一代需要的时间约为（ ）
A、18小时 B、48小时 C、20分钟 D、24小时
4、采样后，应将样品在（ ）条件下尽快送往实验室。
A、4℃ B、0℃ C、-20℃ D、接近原有贮存温度
5、在报告固体样品中菌落总数时，单位是（ ）
A、CFU/mL B、CFU/g C、MPN/mL D、MPN/g
6、一般检查细菌形态最常用的是：（ ）
A、荧光显微镜 B、暗视野显微镜
C、电子显微镜 D、普通光学显微镜
7、显微镜构造的两大部分是：（ ）
A、光学系统和机械系统 B、物镜和目镜
C、反光镜和电源 D、镜头和照明装置
8、在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时，需要用到（ ）。
A、接种环 B、接种针 C、滴管 D、涂布棒
9、含有一种以上的微生物培养物称为（ ）
A、纯培养物 B、混和培养物 C、新鲜培养物 D、陈旧培养物
10、在进行菌种鉴定时，所用的微生物要求为（ ）。
A、混和培养物 B、陈旧培养物 C、新鲜纯培养物 D、斜面培养物
11、中温性微生物的最适生长温度一般在（ ）
A、5℃-10℃ B、20℃-45℃ C、45℃以上 D、-10℃-8℃
12、用倾注平板法分离纯化微生物时，熔化的营养琼脂应保持在（ )
A、55℃-60℃ B、40℃-50℃ C、35℃-37℃ D、100℃
13、斜面接种时取菌的无菌操作正确的顺序是（ )
A、接种环/针灭菌→开启管盖或塞→管口灭菌→挑起菌苔→接种→盖好管盖或塞
B、开启管盖或塞→接种灭菌→管口灭菌→挑起菌苔→接种→盖好管盖或塞
C、接种环/针→开启管盖或塞→ 挑起菌苔→管口灭菌→接种→盖好管盖或塞
D、接种环/针→管口灭菌→开启管盖或塞→挑起菌苔→接种→盖好管盖或塞
14、无菌操作不包括（ ）
A、接种环经火焰灼烧灭菌 B、不带口罩一边讲话，一边划线平板
C、戴无菌手套 D、在火焰周围操作
15、以下属于化学消毒方式的是 （ ）
A、过滤除菌 B、湿热灭菌 C、碘伏消毒 D、干热灭菌
16、培养基中加入某种化学物质，使之抑制某一类细菌生长，而有利于另一类细菌生长，从而将后者筛选出来，这种培养基叫做：（ ）
A、鉴别培养基 B、营养培养基 C、选择培养基 D、基础培养基
17、用于观察细菌动力的培养基是：（ ）
A、固体培养基 B、营养培养基 C、液体培养基 D、半固体培养基
18、细菌学中最常用的染色方法是： （ ）
A、荧光染色 B、瑞士染色 C、革兰染色 D、抗酸染色
19、可以用高压蒸汽灭菌的物品有（ ）
A.密闭的容器 B. 不耐高热的物品
C.不耐高压的物品 D. 耐高压、高热和穿透热的物品
20、三糖铁培养基属于（ ）
A.营养培养基 B. 鉴别培养基
C.选择培养基 D. 厌氧培养基
21、有关培养基的说法，哪项是错误的（ ）
A.固体培养基中琼脂含量为一般为2%左右
B.半固体培养基中琼脂含量为0.2%～0.5%
C、固体培养基中的琼脂具有重要的营养价值
D、观察细菌的动力用半固体培养基
22、用可见分光光度计检测细菌浓度时，经常选用的波长为（ ）
A.600nm B.550nm C.500nm D.450nm E.400nm
23、二级生物安全实验室必须配备的设备是 ( )
A．培养箱 B.水浴箱
C. 生物安全柜和高压灭菌器 D.离心机
24、细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是( )
A.单细胞 B.二分裂方式繁殖
C.对抗生素敏感 D.仅有原始核结构，无核膜
25、有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: ( )
A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阴性菌有鞭毛 C.可用于细菌的鉴定
D.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛
26、有关“芽胞”的叙述，错误的是: ( )
A.革兰阳性菌可产生 B.对热有很弱的抵挡力
C.代谢不活跃 D.通常在细菌处于不利环境下形成
27、用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，当目镜放大倍数为10倍时，总放大倍数为: ( )
A.10倍 B.100倍 C.400倍 D. 1000倍
28、下列哪项试验不是细菌的生化反应: ( )
A.靛基质试验 B.甲基红试验 C.动力试验 D.糖发酵试验
29、消毒是指：( )
A.杀灭物体上包括细菌芽胞在内的所有微生物，杀菌指数达6以上
B.杀灭物体上不包括细菌芽胞在内的所有微生物
C.杀灭物体上的病原微生物，杀菌指数达3以上
D.防止或抑制细菌生长繁殖
30、不含特殊营养成分的普通培养基或器材用高压蒸气灭菌法灭菌时，所需温度和需维持时间分别为：( )
A.100℃，15～20min B.121℃，15～20 min
C.100℃，10 min D.121℃，10 min
31、玻璃器皿干热消毒要求：( )
A、160~170℃ 2h B、160~170℃ 1h
C、100℃ 2h D、150℃ 2h
32、细菌染色标本制作基本步骤：( )
A、涂片—染色—干燥—固定 B、涂片—染色—固定—干燥
C、涂片—干燥—固定—染色 D、涂片—固定—染色—干燥
33、细菌生长繁殖中所需营养物质，其中葡萄糖、淀粉属于哪一类物质：( )
A、碳源 B、氮源 C、无机盐类 D、维生素类
二、判断题部分
1、 采样时应采用随机原则进行，确保所采集的样品具有代表性。（ ）
2、 采样过程要遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染。（ ）
3、 样品保存在4℃时，其微生物的数量不会发生变化。（ ）
4、 一旦得知检验结果，被检样品就可以立即被销毁处理。（ ）
5、 检验结果报告后，剩余样品或同批样品不进行微生物项目的复检。（ ）
6、 检验过程中，可先将结果与现象记录在草稿纸上，最后统一整齐地抄写在原始记录上。（ ）
7、 实验结果的原始记录可以随意划改，只要检验员签名或盖章就行。（ ）
8、 实验室接到送检样品后应认真核对登记，确保样品的相关信息完整并符合检验要求。（ ）
9、 采样应遵循无菌操作程序，采样工具和容器应无菌、干燥、防漏、形状和大小适宜。（ ）
10.采样单信息包括样品名称、采样地点、采样数量、样品批号等，但不包括采样人员。（ ）
11、实验室应按照检验方法中规定的要求，准确、客观地报告每一项检验结果。（ ）
12、检验报告中应该包括的项目有样品信息、受检单位信息（或和生产单位信息）、委托单位信息、检验依据、检验项目、检验结果、检验人、审核员和报告批准人。（ ）
13、普通光学显微镜的使用要遵循从低倍镜到高倍镜，再到油镜的程序。（ ）
14、根据所操作的生物因子危害程度和采取的防护措施，将生物安全防护水平（BSL）分为4级。I级防护水平最低，IV级防护水平最高。（ ）
15、检测菌落总数时，若空白对照有少量菌生长，可用样品菌落数减去空白对照菌落数，再进行计算。（ ）
16、查大肠菌群最可能数（MPN）检索表时，当检样量增加10倍时，查表所得数字也应相应增加10倍。（ ）
17、设备的安装和存放应便于操作，易于维护、清洁和校准。 （ ）
18、使用完普通光学显微镜后不需要将载物台降至最低位置。（ ）
19、观察细菌染色后的载玻片可以随意丢弃。（ ）
20、超净工作台应每年一次或按生产商推荐频率进行全面检修和机械检查。（ ）
21、实验室负责人应确保每位操作人员均按照说明书或设备操作指导书的要求进行操作仪器设备。（ ）
22、无需对高压灭菌锅进行及时的除锈和换水。（ ）
23、无需对生物安全柜进行定期的性能确认。（ ）
24、因仪器设备出现故障而中断检测时，原检测数据仍然有效。（ ）
25、任何设备，若出现故障，都应立即停用。（ ）
26、培养箱、干热灭菌箱首次安装使用时需对温度的稳定性和一致性进行校准。（ ）
27、用过油镜头后，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2—3次，最后再用擦镜纸将二甲苯擦去。（ ）
28、显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10×，目镜为10×，其放大倍数就为10×10=100。（ ）
29、微生物接种就是将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。（ ）
30、在实验室用得最多的微生物接种工具是接种环、接种针。（ ）
31、有时滴管、吸管也可作为微生物接种工具进行液体接种。（ ）
32、在实验室检验中的各种微生物接种必须是无菌操作。（ ）
33、如果一个菌落中的所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为混合培养。（ ）
34、微生物接种时，刚过火焰灭菌的接种环，热度高，不能直接挑取菌种，应待接种环冷却后方可挑取菌种。（ ）
35、稀释菌液时，可用同一支吸管稀释混匀几个浓度的菌液。（ ）
36、干燥箱灭菌的物品放在箱内，可不留空隙，可接触四壁。( )
37、含有不稳定成分（如糖类）的培养基灭菌时，一般用121℃高压灭菌15min。( )
38、革兰染色复染后染成红色者为革兰阳性菌，染成紫色者为革兰阴性菌。( )
39、培养基配制完成，并且灭菌以后就可以直接使用，无需做无菌检测。( )
40、革兰染色中所使用的细菌最好是正处在对数期生长的细菌，这样得到的细菌染色形态才典型。( )
41、灭菌指杀灭物体上一切活的微生物的方法，包括细菌芽胞在内的致病微生物和非致病微生物。( )
42、消毒指杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌的芽胞。( )
43、高压蒸汽灭菌时，物品包装不宜过大，安放的物品勿超过灭菌器腔体的2/3，物品之间应留有空隙，以利于蒸汽流通。( )
44、干热灭菌时间从烤箱内温度达到要求温度时算起。( )
45、配置培养基所用的容器，不能用铜或铁锅，因为培养基内的含铜量每1000ml如超过0.3mg时，细菌不能生长；含铁量如1000ml超过0.11mg时，则妨碍细菌毒素的产生。 ( )
46、培养基分装灭菌时，不宜超过容积的2/3，以免灭菌时溢出。( )
47、高压灭菌的时间不宜过长。因高压加热时间长，能使培养基变质；琼脂高压灭菌时间长，会引起沉淀。含糖类培养基高压时间过长可能被破环。( )
48、制好的培养基保存，应注明日期，不宜存放过久，大多宜存放于4℃冰箱内。( √)
49、以杀灭芽胞作为消毒灭菌是否彻底的指标。( )
50、检测大肠菌群试验中，配制煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）需要在试管中加入一个倒置的小导管。( )
51、病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室（BSL-2）进行。（ ）
52、一般样品检验应该在洁净区域（包括超净工作台或洁净室）进行，洁净区应有明显的标示。（ ）
53、微生物检验实验室应采用单方向工作流程，避免交叉污染。（ ）
54、实验室的工作区域与办公区域可以不分开。（ ）
55、实验室内环境的温度、湿度、照度、噪音和洁净度等应符合工作要求。（ ）
56、微生物检验人员应具有相应的教育、微生物培训经历，具备相应的资质，能够理解并正确实施检验。（ ）
57、检验人员应掌握生物检验安全操作知识和消毒知识。（ ）
58、检验人员应保持个人卫生和整洁，防止人为污染样品。（ ）
59、检验人员应在检验过程中遵守相关预防措施的规定，保证自身安全。（ ）
60、有颜色视觉障碍的人员不能执行涉及到辨色的试验。（ ）
61、实验设备应定期进行检查、检定（加贴标识）、维护和保养，以保证工作性能和操作安全。（ ）
62、实验设备应有日常性监控记录和使用记录。（ ）
63、实验室应保存能满足实验需要的标准或参考菌株，在购入和传代保存过程中，应进行验证试验，并进行文件化管理。（ ）
64、高压蒸汽灭时，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能达到饱和，虽然压力表显示达到了灭菌压力，但蒸汽的温度却未达到要求的温度，最后导致灭菌不彻底。( )
65、超净工作台采用层流技术净化空气。（ ）
66、在生物安全二级实验室必须要有生物安全柜。( )
67、各级实验室的生物安全防护要求依次为：一级最高，四级最低。( )
68、生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。只要有生物安全柜，个人防护就不重要了。 ( )
69、实验室生物安全（laboratory biosafety）工作是为了在从事病原微生物实验活动的实验室中避免病原微生物对工作人员的危害，不管对环境的污染。（ ）
70、生物安全实验室是指通过规范的设计建造、合理的设备配置、正确的装备使用，标准化的程序操作、严格的管理规定等，确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，四周环境不受其污染，实验因子保持原有本性而采取综合措施的实验室。（ ）
71、在二级以上的生物安全防护实验室的入口明显位置处必须贴有生物危险标志，并标明级别。（ ）
72、可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(II级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。（ ）
三、简答题部分
1、大肠菌群计数检测中，某样品接种的三个连续梯度为1g、0.1g、0.01g，每个梯度接种3管，初发酵阳性管数为3-3-1，复发酵阳性管数为3-2-0，问每g该样品中大肠菌群最可能数（MPN）多少？（每g检样中大肠菌群最可能数（MPN）的检索见表1）
表1 大肠菌群最可能数（MPN）检索表
阳性管数 | MPN | 95%可信区间 | |||
0.1 | 0.01 | 0.001 | 上限 | 下限 | |
3 | 1 | 0 | 43 | 9 | 180 |
3 | 2 | 0 | 93 | 18 | 420 |
3 | 2 | 1 | 150 | 37 | 420 |
3 | 3 | 0 | 240 | 42 | 1000 |
3 | 3 | 1 | 460 | 90 | 2000 |
3 | 3 | 2 | 1100 | 180 | 4100 |
3 | 3 | 3 | ＞1100 | 420 | —— |
2、某液体样品检测菌落总数时结果记录见下表，求该检样的菌落总数。
稀释度 | 1：100（第一稀释度） | 1：1000（第二稀释度） |
菌落数（CFU） | 232，244 | 33，35 |
3、什么是平板划线接种方法？
4、什么是穿刺接种方法？
5、什么是涂布接种方法？
6、简述高压蒸汽灭菌的原理？
7、相同温度条件下，湿热灭菌比干热灭菌效力大的原因？
8、简述革兰氏染色法？
9、BSL-2实验室生物安全设备有哪些，有哪些使用的基本要求？
10、生物安全实验室常用的个人防护物品？
