3.2微生物检验技术
一、选择题
1、 按照GB/T4789.2，适宜计数的菌落数范围是：（ ）
A、20CFU~200CFU
B、30CFU~300CFU
C、40CFU~300CFU
D、50CFU~250CFU
2、 按照GB/T4789.2测定液体样品时，若两个接种最低稀释度样品的平板均无菌落生长，则应报告（ ）CFU/mL。
A、0
B、<1
C、<10
D、<1×最低稀释倍数
3、 下列关于大肠菌群的描述不正确的是：（ ）
A、能发酵乳糖，产酸不产气
B、需氧和兼性厌氧菌
C、革兰氏阴性杆菌
D、无芽孢杆菌
4、 下列关于沙门氏菌属在三糖铁琼脂培养基内的反应结果描述不正确的是：（ ）
A、斜面为红色
B、斜面为黄色
C、多数底层产气
D、多数底层变黑
5、 下列关于志贺氏菌在SS琼脂培养基平板上的菌落特征描述正确的是：（ ）
A、中心黑色或几乎全黑色菌落
B、粉红色湿润菌落
C、无色透明菌落
D、蓝绿色或蓝色，有金属光泽
6、 下列生化反应结果不属于大肠埃希氏菌的是：（ ）
A、TSI斜面产酸或不产酸，斜面产酸
B、H2S阳性
C、KCN阴性
D、尿素阴性
7、 下列菌株具有嗜盐性的为：（ ）
A、沙门氏菌
B、志贺氏菌
C、空肠弯曲菌
D、副溶血性弧菌
8、 下列哪项试验与副溶血性弧菌分离株的致病性显著相关（ ）
A、血浆凝固酶试验
B、过氧化氢酶试验
C、神奈川试验
D、氧化酶试验
9、 下列关于典型的金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上的菌落形态描述错误的是：（ ）
A、菌落直径为2mm~3mm
B、菌落呈金黄色
C、菌落周围为一浑浊带，在其外层有一透明圈
D、用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度
10、下列关于金黄色葡萄球菌的描述正确的是：（ ）
A、革兰氏阳性球菌，无芽孢，有荚膜
B、血浆凝固酶试验阴性
C、在血平板上形成的菌落较大，圆形，光滑凸起，均为金黄色
D、在血平板上菌落周围形成明显的β型溶血环
11、根据链球菌在血平板上的溶血情况，溶血性链球菌属于：（ ）
A、甲型溶血性链球菌
B、乙型溶血性链球菌
C、丙型溶血性链球菌
D、丁型溶血性链球菌
12、以下菌株为革兰氏阳性菌的是：（ ）
A、副溶血性弧菌
B、小肠结肠耶尔森氏菌
C、产气荚膜梭菌
D、志贺氏菌
13、根据GB4789.15-2010霉菌和酵母菌的计数方法中，霉菌和酵母菌的培养条件为：（ ）
A、28℃±1℃培养5d
B、28℃±1℃培养3d
C、25℃±1℃培养5d
D、25℃±1℃培养3d
14、根据GB4789.35-2010食品中乳酸菌的检验方法，下列菌属不属于乳酸菌的是：（ ）
A、链球菌属
B、葡萄球菌属
C、双歧杆菌属
D、乳杆菌属
15、下列关于食品中乳酸菌的检验方法描述错误的是：（ ）
A、从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成
B、嗜热链球菌在MC琼脂平板上的菌落为中等偏小，边缘整齐光滑的红色菌落
C、乳酸菌总数结果减去双歧杆菌与嗜热链球菌计数结果之和即得乳杆菌计数
D、双歧杆菌和嗜热链球菌的培养条件均为36℃±1℃，厌氧培养48h±2h
16病原微生物分离鉴定工作应在（ ）进行。
A、一级生物安全实验室
B、二级生物安全实验室
C、三级生物安全实验室
D、四级生物安全实验室
17、细菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质和：（ ）
A、鞭毛、荚膜
B、核质、质粒
C、荚膜、芽孢
D、质粒、鞭毛
18、酵母菌属于：（ ）
A、原核微生物
B、真核微生物
C、非细胞型微生物
D、霉菌
19、下列哪种细菌结构对外界环境有极强的抵抗力，是细菌休眠状态的细胞：（ ）
A、荚膜
B、芽孢
C、鞭毛
D、纤毛
20、细菌的生长曲线分为四个时期，其中细菌对外界环境因素作用十分敏感的时期是：（ ）
A、延缓期
B、对数生长期
C、稳定期
D、衰亡期
21、无菌室的熏蒸消毒，主要采用（ ）熏蒸消毒法。
A、甲醛
B、甲醇
C、乙醛
D、乙醇
22、用物理的、化学的或生物学的方法杀死病原微生物的过程称为（ ）
A、灭菌
B、消毒
C、防腐
D、无菌
23、干热灭菌法要达到灭菌目的，所需的温度和时间条件是：（ ）
A、150℃，维持2h
B、160℃，维持2h
C、170℃，维持3h
D、180℃，维持3h
24、显微镜的基本构造包括光学部分和机械部分，下列不属于光学部分的是：（ ）
A、物镜
B、集光器
C、光圈
D、反光镜
25、油镜的分辨率可达到（ ）
A、0.4µm
B、0.3µm
C、0.2µm
D、0.1µm
26、培养基按照其作用可分为：（ ）
A、固体培养基和液体培养基
B、厌氧培养基和鉴别培养基
C．合成培养基和加富培养基
D、天然培养基和活体培养基
27、伊红-美蓝（EMB）培养基属于：（ ）
A、加富培养基
B、选择培养基
C、厌氧培养基
D、鉴别培养基
28、琼脂是培养基的主要成分之一，它属于（ ）
A、营养物质
B、凝固物质
C、抑制剂
D、指示剂
29、革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由于这两类细菌的（ ）不同而决定的。
A、细胞膜
B、细胞核
C、细胞壁
D、细胞质
30、革兰氏染色结果是否正确，（ ）是革兰氏染色操作的关键环节。
A、初染
B、媒染
C、脱色
D、复染
31、过滤分装培养基时，固体培养基分装量为管高的（ ）
A、二分之一
B、三分之一
C、四分之一
D、五分之一
32、以下哪种接种方法主要用于接种纯菌，用以鉴定或保存菌种。（ ）
A、斜面接种法
B、液体接种法
C、平板接种法
D、穿刺接种法
33、肉渣（庖肉）培养法属于（ ）
A、需氧培养法
B、二氧化碳培养法
C、厌氧培养法
D、一般培养法
34、目前最有效的菌种保藏方法是：（ ）
A、斜面保藏
B、石蜡油封存
C、冷冻干燥保藏法
D、沙土管保藏
35、乙酰甲基甲醇试验阳性反应时，培养液呈（ ）
A、蓝色
B、红色
C、黄色
D、无色
36、食品中水分对微生物生长有重要影响，下列微生物中，对水分要求最低的是：（ ）
A、大肠杆菌
B、金黄色葡萄球菌
C、酵母菌
D、霉菌
37、下列实验室中常用的消毒灭菌化学试剂属于氧化剂类别的是：（ ）
A、来苏水
B、乙醇
C、漂白粉
D、石灰水
38、紫外线杀菌的原理为：（ ）
A、紫外线使细菌体内蛋白质变性凝固，酶失活，从而达到杀菌目的。
B、紫外线在DNA中引起胸腺嘧啶双聚体形成，从而干扰了DNA复制，导致细菌死亡或变异。
C、紫外线能水解蛋白质和核酸，使微生物的酶系统和细胞结构受到破坏，引起菌体死亡。
D、紫外线作用于微生物蛋白质结构中的氨基、羟基或其他化学基团，造成代谢机能障碍而死亡。
39、微生物检验室常用的玻璃器皿，如平皿、吸管等最常用的灭菌方式是：（ ）
A、湿热灭菌法
B、干热灭菌法
C、紫外线杀菌法
D、煮沸消毒法
40、乳糖胆盐培养基的各成分中，属于指示剂的是：（ ）
A、蛋白胨
B、胆盐
C、乳糖
D、溴甲酚紫
41、霉菌营养体的基本形态单位是：（ ）
A、孢子
B、吸器
C、菌丝
D、子囊果
42、半固体穿刺保藏法可保藏：（ ）
A、3个月至半年
B、半年至一年
C、一年只两年
D、数十年
43、下列关于原核细胞微生物的说法不正确的是：（ ）
A、只有原始核，无核膜、核仁
B、细菌和蓝藻都属于原核细胞微生物
C、原核细胞微生物进化程度低于真核细胞微生物
D、放线菌能形成分生孢子或孢子囊，与霉菌相似，不属于原核细胞微生物
44、下列关于蓝细菌说法不正确的是：（ ）
A、蓝细菌又称蓝藻，属真核细胞微生物
B、蓝细菌主要为分裂生殖
C、蓝细菌可进行光合作用，是自养型微生物
D、蓝细菌与“水化”和“赤潮”的形成有关
45、下列关于真菌的说法正确的是：（ ）
A、可进行光合作用
B、以产生大量孢子进行繁殖
C、按形态分为单细胞和多细胞两类
D、一般具有发达的菌丝体
46、下列关于酵母菌的说法不正确的是：（ ）
A、属于单细胞型真菌
B、以裂殖方式繁殖为主，个别为出芽繁殖
C、可发酵糖类产能
D、能在酸度较大的水环境中生长
47、下列关于细胞膜的说法不正确的是：（ ）
A、细胞膜有平行排列的双层脂质组成，内嵌多种蛋白质和少量多糖
B、细胞膜是质地柔韧，富有弹性的液性膜状结构
C、细胞膜主要功能是固定细菌的外形
D、细胞膜有物质纳泄，生物合成、呼吸作用及形成中介体的作用
48、下列关于鞭毛的说法错误的是：（ ）
A、鞭毛是细菌的运动器官
B、在球状细菌中，仅有个别属的细菌才有鞭毛
C、鞭毛需要用电子显微镜或者经过特殊染色使鞭毛增粗后用普通显微镜观察
D、鞭毛的主要功能是起粘附作用，使细菌吸附在其他细菌和病毒上
49、下列关于霉菌孢子的说法不正确的是：（ ）
A、孢子为霉菌的繁殖体
B、孢子可分有性孢子和无性孢子
C、一条菌丝可产生多个孢子
D、霉菌的孢子与细菌的芽孢英文均为Spore，两者都对外界环境具有很强的抵抗力
50、下列关于空气中微生物的说法不正确的是：（ ）
A、空气中细菌含量与含尘量呈线性关系
B、空气中不具备微生物生长繁殖所需的生活条件
C、革兰氏阳性菌比阴性菌在空气中很更容易死亡
D、空气中微生物主要来自随风飘扬的微生物孢子和芽孢
51、下列有关抗原的说法错误的是：（ ）
A、抗原物质具有免疫原性和反应原性
B、一种物质能否作为抗原，取决于动物能否对它发生免疫应答
C、动物间的系统发育关系越远，组织结构差异越大，抗原性越强
D、抗原按物质所起作用分为完全抗原和半抗原
52、下列关于抗体的叙述错误的是：（ ）
A、抗体是能与抗原发生特异性结合的球蛋白
B、抗体存在于血液、淋巴液和组织液中
C、IgM在血液中维持时间较长，可达数年之久
D、抗体可分为IgG,IgA,IgM,IgD和IgE
53、下列关于培养基说法不正确的是：（ ）
A、培养基时以人工方法配制成的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
B、培养基应具有适宜的pH，一定的缓冲能力，一定的氧化还原电位及适宜的渗透压。
C、肉汤培养基和血平板属于加富培养基。
D、活的动植物也可作为培养基。
54、培养基中含有多种营养物质，下列物质可作为碳源的是：（ ）
A、甘露醇
B、氯化钠
C、酪蛋白
D、维生素
55、为了便于了解和观察细菌是否利用和分解糖类等物质，常在某些培养基中加入一定种类的指示剂，下列指示剂属于氧化还原指示剂的是：（ ）
A、溴甲酚紫
B、溴麝香草酚蓝
C、甲基红
D、美蓝
56、下列关于放线菌的菌落说法不正确的是：（ ）
A、菌落早期同细菌菌落相似
B、菌落后期形成孢子菌落，成粉状，干燥
C、菌落呈黑色
D、菌落呈同心圆放射状
57、下列关于冷冻干燥保藏法说法错误的是：（ ）
A、用于冷冻干燥保藏的安瓿管需用2%盐酸浸泡后清洗
B、使用鲜牛奶作为保护剂
C、真空干燥前需将安瓿管放在-40~-25℃的环境中预冻1h
D、做好的安瓿管放在低温避光处保藏
58、真菌细胞不具有的结构或成分是：（ ）
A、细胞壁
B、核仁
C、染色体
D、叶绿素
59、大多数沙门氏菌不发酵：（ ）
A、葡萄糖
B、麦芽糖
C、甘露醇
D、乳糖
60、大肠杆菌O157:H7属于：（ ）
A、肠致病性大肠埃希氏菌
B、肠产毒性大肠埃希氏菌
C、肠侵袭性大肠埃希氏菌
D、肠出血性大肠埃希氏菌
二、选择题
1、采样方案分为二级和三级采样方案。（ ）
2、当平板上的菌落出现链状生长时，可将每条链作为一个菌落计数。（ ）
3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。（ ）
4、大肠菌群是一种需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性杆菌，在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气，并具有相同的生化及血清学反应。 （ ）
5、大肠菌群MPN计数法中初发酵试验主要观察培养基是否产酸。（ ）
6、双歧杆菌为革兰式阳性杆菌。（ ）
7、在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物不是志贺氏菌。（ ）
8、典型的副溶血性弧菌在TCBS上呈圆形，半透明、表面光滑的绿色菌落。（ ）
9、小肠结肠耶尔森氏菌为革兰氏阴性球杆菌，有时呈椭圆或杆状，培养温度为26℃±1℃。（ ）
10、金黄色葡萄球菌不是肠道致病菌，不产生肠毒素。（ ）
11、金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽孢，无荚膜。（ ）
12、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌在血平板上都能形成无色透明的溶血圈。（ ）
13、霉菌和酵母菌计数应选取菌落数在30CFU~300CFU的平板。（ ）
14、单核细胞增生李斯特菌在协同溶血试验中，靠近马红球菌的接种端溶血增强。（ ）
15、乳酸菌总数检测，选择2个~3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，及时倾注冷却至46℃的MRS培养基。（ ）
16、细菌按其外形可分为球菌、杆菌、螺旋菌。（ ）
17、霉菌由菌丝和孢子组成，菌丝为霉菌的繁殖体。（ ）
18、使用煮沸消毒法时，如在沸水中加入2%~5%的石碳酸，则5~10min可杀死芽孢。（ ）
19、霉菌、酵母菌生长的最适pH为6.8~7.4。（ ）
20、暗视野显微镜的分辨率比普通显微镜大。（ ）
21、革兰氏染色后呈蓝紫色的细菌为革兰氏阴性菌。（ ）
22、制作斜面固体培养基时，斜面长度一般不超过试管长度的1/3为宜。 （ ）
23、一般细菌和病毒对氢离子比霉菌和酵母菌对氢离子敏感。（ ）
24、一般革兰氏阴性杆菌对于碱类较革兰氏阳性杆菌敏感。（ ）
25、煌绿在培养基主要成分中属于指示剂。（ ）
26、大多数微生物适宜在高渗透压的食品中生长。（ ）
27、食品中污染的微生物根据其危害性不同可分为腐败菌和病原菌。（ ）
28、当食品的水活性高、含糖丰富时，霉菌生长良好；干燥食品和水果、蔬菜等，细菌繁殖占优势。（ ）
29、少量经口摄入的微生物一般对人体是无害的。（ ）
30、通常认为相对分子量低于50000的分子是没有免疫原性的。（ ）
31、放线菌是比细菌进化的更高一级的类群。（ ）
32、纤毛多长于革兰氏阳性菌菌体上。（ ）
33、芽孢形成的重要诱因是营养物质的缺乏，特别是氮源或碳源或两者的缺乏。（ ）
34、抗体出现的顺序，一般IgG最早，IgA最晚。（ ）
35、无菌室通常包括缓冲间和工作室两大部分。（ ）
36、新玻璃器皿初次使用时应先用自来水冲洗干净后用去离子水冲洗。（ ）
37、为使实验室空气流通生物安全柜可以放在与门或窗相对的位置。（ ）
38、显微镜的光学系统中物镜的性能最为关键。（ ）
39、琼脂是培养基中的凝固物质，并且对细菌有一定的营养价值。（ ）
40、经常使用的细菌菌株，采用斜面保藏法比较好。（ ）
三、 简答题
1、 简述革兰氏染色的步骤。
2、 简述培养箱的使用与维护。
3、 简述高压锅的操作方法与注意事项。
4、 为什么湿热灭菌比干热灭菌的灭菌效果好？
5、 简述消毒和灭菌的区别。
6、 细菌染色前必须固定细菌，其目的是什么？常用的固定方法有哪些？
7、 什么叫菌落？
8、 细菌有哪些特殊结构？各有什么作用？
9、 怎样鉴别酵母菌菌落与细菌菌落？
10、真菌的五大特点是什么？
11、简述培养基的配置原则。
12、食品中微生物污染途径有哪些？
